文章背景簡介

BACKGROUND INTRODUCTION

肝癌（HCC）是最難治的惡性腫瘤之一，特別是當(dāng)它進展到晚期并且手術(shù)切除不再可行時，化療基本上就是這些患者可用的唯一選擇。依托泊苷（VP16）和喜樹堿（CPT）是臨床上常用的化療藥物，可誘導(dǎo)癌細(xì)胞DNA損傷并導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。然而，由于突變的積累，大多數(shù)HCC細(xì)胞中的DNA修復(fù)系統(tǒng)異�；钴S、DNA修復(fù)能力提高，導(dǎo)致化療效果差。最近的研究表明，當(dāng)癌細(xì)胞中的DNA修復(fù)途徑被阻斷時，化療和放療的效果可以被顯著增強，因此，一些DNA修復(fù)阻斷劑已被廣泛用于臨床治療，這類藥物可以減少化療藥物的劑量，提高其治療效果。

DNA損傷修復(fù)是維持染色體穩(wěn)定性的重要機制，DNA修復(fù)過程中蛋白質(zhì)的失調(diào)增加了DNA突變的可能性，并會導(dǎo)致細(xì)胞死亡或致癌。DNA修復(fù)機制可細(xì)分為兩大類：雙鏈斷裂修復(fù)（ DSBR ）和單鏈斷裂修復(fù)（ SSBR ） 。同源重組（ HR ）是DSBR的主要機制，RAD51是參與這一過程的關(guān)鍵蛋白。RAD51蛋白會結(jié)合單鏈DNA以促進HR完成DNA修復(fù)，如果抑制RAD51表達則會強烈阻礙DNA修復(fù)過程。因此，許多RAD51抑制劑已被確認(rèn)為HCC治療的輔助療法，并已被證明能增強化療和放療的效果。

褪黑素是人腦中松果體分泌的主要激素。 除了調(diào)節(jié)睡眠－覺醒周期外，褪黑素及其代謝產(chǎn)物還是很強的自由基清除劑，可減少生理代謝過程中產(chǎn)生的過氧化物對細(xì)胞造成的損害。此外，褪黑素可以激活免疫，抑制血管生成和細(xì)胞生長，并抑制幾種癌癥的轉(zhuǎn)移。雖然最近有研究報道褪黑素可以抑制肝癌細(xì)胞系的生長和轉(zhuǎn)移，但研究結(jié)果僅限于細(xì)胞實驗，其下游調(diào)控機制尚不清楚。

2018年，臺灣長庚大學(xué)的Chin－Chuan Chen等人在《Cancers》（IF＝5．326，醫(yī)學(xué)2區(qū)）發(fā)表了題為“Melatonin Sensitizes Hepatocellular Carcinoma Cells to Chemotherapy Through Long Non－Coding RNA RAD51－AS1－Mediated Suppression of DNA Repair”的文章。

02

所用到的主要方法

METHODS

1．彗星實驗：又稱單細(xì)胞凝膠電泳實驗，是由Ostling等于1984年首次提出的一種通過檢測DNA鏈損傷來判別遺傳毒性的技術(shù)。

2．免疫熒光

3．HR分析

4．全轉(zhuǎn)錄組測序

5．小鼠異種移植實驗

6．免疫組織化學(xué)染色

03

文章主要內(nèi)容摘要

ABSTRACT

大多數(shù)肝癌（ HCC ）細(xì)胞的DNA修復(fù)系統(tǒng)由于累積突變而異常活躍，DNA修復(fù)能力提高，從而導(dǎo)致對化療和放療的抵抗。因此，靶向DNA修復(fù)機制是HCC中常見的治療方法，可以增強癌細(xì)胞對DNA損傷的敏感性。在這項研究中，作者分析了褪黑素的抗HCC作用并闡明了其調(diào)節(jié)機制。功能分析實驗結(jié)果表明：褪黑激素除抑制HCC細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力外，還會抑制其DNA修復(fù)能力，從而促進化療和放療的細(xì)胞毒性。全轉(zhuǎn)錄組與功能獲得及喪失分析顯示：褪黑素會誘導(dǎo)長鏈非編碼RNA（LncRNA）RAD51－AS1的表達，該LncRNA可與RAD51 mRNA結(jié)合并抑制其翻譯，從而有效降低HCC細(xì)胞的DNA修復(fù)能力，提高其對化療和放療的敏感性。動物模型進一步證明，與單一療法相比，褪黑素和化療藥物依托泊苷（VP16）的組合可顯著抑制腫瘤生長。我們的研究結(jié)果表明，褪黑素是HCC化療和放療的潛在輔助治療方法。