文章背景簡(jiǎn)介

BACKGROUND INTRODUCTION

膽管癌可分為肝內(nèi)、門周和遠(yuǎn)端膽管癌，是高致死率的疾病。肝內(nèi)膽管癌（ICC）是原發(fā)性肝癌的第二常見類型，近幾十年來，其發(fā)病率和死亡率在世界范圍內(nèi)呈上升趨勢(shì)。雖然ICC的治療可以采用手術(shù)切除、肝移植、全身化療、經(jīng)動(dòng)脈化療栓塞（TACE）、射頻消融術(shù)等多種方法，但患者的預(yù)后仍然很差。

三氧化二砷（As2O3，ATO），是最具商業(yè)價(jià)值的砷化合物，同時(shí)也是最古老的毒物之一，無臭無味，外觀為白色霜狀粉末，故稱砒霜。研究已經(jīng)證實(shí)ATO在體外和體內(nèi)都具有抗腫瘤活性，但單獨(dú)使用ATO治療并不能使患者獲益，如要達(dá)到所需治療劑量，則ATO的毒副作用風(fēng)險(xiǎn)又嚴(yán)重限制了臨床應(yīng)用。因此，需要開發(fā)新的策略來增強(qiáng)ATO的抗腫瘤活性或逆轉(zhuǎn)耐藥性、減少所需劑量和ATO相關(guān)的副作用。

2017年，浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院的Sunbin Ling等人在《Journal of Hematology ＆ Oncology》（IF＝7．333，醫(yī)學(xué)1區(qū)）發(fā)表了題為“Metformin potentiates the effect of arsenic trioxide suppressing intrahepatic cholangiocarcinoma： roles of p38 MAPK，ERK3， and mTORC1”的文章，對(duì)上述問題進(jìn)行了探究。

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所用到的主要方法

METHODS

1．細(xì)胞培養(yǎng)

2．實(shí)時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)監(jiān)測(cè)

3．細(xì)胞活力檢測(cè)

4．細(xì)胞周期、凋亡和ROS檢測(cè)

5．蛋白質(zhì)免疫印跡

6．異種移植模型分析

7．免疫熒光

8．TUNEL檢測(cè)

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文章主要內(nèi)容摘要

ABSTRACT

三氧化二砷（ATO）是一種主要用于治療急性早幼粒細(xì)胞白血�。ˋPL）的中藥。對(duì)于實(shí)體腫瘤，雖然大量研究已經(jīng)證實(shí)ATO在體外和體內(nèi)都具有抗腫瘤活性，但單獨(dú)使用ATO治療并不能取得令人滿意的療效，且當(dāng)治療需要增加劑量（例如耐藥性）時(shí)其毒副作用則又嚴(yán)重限制了臨床應(yīng)用。不過，值得注意的是，當(dāng)與其他藥物或放射療法聯(lián)合使用時(shí)，ATO依然還是會(huì)顯示出具有可控毒性的治療效果。

二甲雙胍是一種廣泛應(yīng)用于世界各地的抗II型糖尿病治療藥物，同時(shí)也被認(rèn)為是一種有效的預(yù)防和治療癌癥的藥物。2013年，研究顯示二甲雙胍能夠抑制ICC細(xì)胞的生長(zhǎng)。流行病學(xué)研究報(bào)告顯示：在糖尿病患者中，使用二甲雙胍可使ICC風(fēng)險(xiǎn)降低60％。此外，研究還發(fā)現(xiàn)二甲雙胍能有效增強(qiáng)ICC細(xì)胞對(duì)索拉非尼、5－氟尿嘧啶、三氧化二砷（ATO）等化療藥物的敏感性。單用二甲雙胍治療ICC時(shí)療效并不算理想，但聯(lián)合常規(guī)化療則可提高療效。

結(jié)果：二甲雙胍和ATO通過促進(jìn)細(xì)胞凋亡、誘導(dǎo)G0／G1細(xì)胞周期阻滯、增加細(xì)胞內(nèi)ROS，協(xié)同抑制ICC細(xì)胞增殖。二甲雙胍與ATO聯(lián)合治療可有效減少ICC異種移植模型中ICC的生長(zhǎng)。機(jī)制上，抗體陣列分析顯示ERK3在二甲雙胍和ATO處理后CCLP－1細(xì)胞中變化最大。蛋白質(zhì)免疫印跡結(jié)果證實(shí)，二甲雙胍與ATO可協(xié)同抑制mTORC1，活化AMP活化蛋白激酶（AMPK），上調(diào)ERK3。二甲雙胍消除了ATO誘導(dǎo)的p38 MAPK的活化，該活性部分依賴于AMPK的活化。應(yīng)用SB203580或特異性siRNA抑制p38 MAPK，可以在二甲雙胍和ATO聯(lián)合處理的ICC細(xì)胞中促進(jìn)mTORC1的失活。p38 MAPK的激活可能是ICC對(duì)ATO耐藥的原因。盡管本文中并沒有對(duì)p38 MAPK與ERK3之間的關(guān)系做出明確的定義，但AMPK是ERK3的一個(gè)新發(fā)現(xiàn)的正向調(diào)節(jié)因子。EKR3過表達(dá)會(huì)通過失活mTORC1而抑制ICC細(xì)胞增殖，且ERK3的表達(dá)與ICC患者預(yù)后具有良好的相關(guān)性。

結(jié)論：二甲雙胍通過調(diào)控AMPK／p38 MAPK ERK3／mTORC1通路，增強(qiáng)三氧化二砷敏感，抑制肝內(nèi)膽管癌。ERK3是一種新的ICC預(yù)后預(yù)測(cè)因子，在ICC中發(fā)揮腫瘤抑制因子的作用。