【聚焦】人工合成寡核苷酸探針特點突出 在生命科學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛
人工合成寡核苷酸探針可以利用酶、熒光染料進行標記;人工合成寡核苷酸探針一次合成可得到大量產(chǎn)品,成本較低。
人工合成寡核苷酸探針,是以核苷酸為原料,利用DNA合成儀,人工合成的生物探針,屬于核酸探針的一種。從細胞中提取出來的DNA片段,存在高度重復(fù)的序列,人工合成寡核苷酸探針根據(jù)目的基因設(shè)計,避免了這一缺點。
根據(jù)新思界產(chǎn)業(yè)研究中心發(fā)布的《2024-2029年中國人工合成寡核苷酸探針行業(yè)市場深度調(diào)研及發(fā)展前景預(yù)測報告》顯示,人工合成寡核苷酸探針的制作,需要知道目的基因序列,根據(jù)目的基因進行設(shè)計,合成的探針序列較短,為十幾個到幾十個核酸片段,與目的基因互補,無需再純化,復(fù)雜度低,且雜交條件與細胞提取DNA探針相同,通常為單鏈探針,具有組織穿透性好、穩(wěn)定性好、特異性高、雜交速度快等特點。
人工合成寡核苷酸探針經(jīng)過示蹤物標記,與樣品中核酸分子進行雜交,當(dāng)樣品中存在與其互補的核酸序列,二者相連形成雙鏈,之后未雜交探針被洗去,通過探針標記物的自顯影、發(fā)光效果,對人工合成寡核苷酸探針進行檢測,進而測定樣品中是否含有與人工合成寡核苷酸探針互補的核酸序列。
人工合成寡核苷酸探針可以識別目的基因序列中一個堿基的變化,即通過雜交來識別單個堿基突變、單個堿基錯配情況;人工合成寡核苷酸探針可以利用酶、熒光染料進行標記;人工合成寡核苷酸探針一次合成可得到大量產(chǎn)品,成本較低。
但人工合成寡核苷酸探針的長度必須適中,太長或者太短都會導(dǎo)致雜交過程出現(xiàn)問題;且由于人工合成寡核苷酸探針片段較短,攜帶的標記物較少,又采用的是非放射性同位素標記,敏感度有限;此外人工合成寡核苷酸探針與mRNA雜交形成的雙鏈,穩(wěn)定性低于cRNA探針與mRNA形成的雙鏈。
核酸探針細分產(chǎn)品主要包括DNA探針、cDNA探針、cRNA探針、人工合成寡核苷酸探針四種,前三種均為克隆產(chǎn)品,而后一種為人工合成產(chǎn)品,更易于大批量生產(chǎn),因此在生命科學(xué)實驗、生物醫(yī)藥原料藥制備等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。此外,人工合成寡核苷酸探針還可以應(yīng)用到基因診斷、個體化用藥分析等方面。
新思界行業(yè)分析人士表示,DNA合成儀是自動化合成結(jié)構(gòu)類似DNA或RNA的寡核苷酸的儀器,是人工合成寡核苷酸探針行業(yè)的核心上游設(shè)備,其設(shè)計、研發(fā)、生產(chǎn)技術(shù)壁壘高。近年來,受生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)等行業(yè)快速發(fā)展,我國市場對DNA合成儀需求快速增長。目前,我國已經(jīng)具備DNA合成儀生產(chǎn)能力,但產(chǎn)品品質(zhì)與進口產(chǎn)品相比存在較大差距,對我國人工合成寡核苷酸探針行業(yè)發(fā)展造成一定不利影響。
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